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Fortis 液相色谱柱出现“堵”的原因分析
  • 发布日期:2019-11-19      浏览次数:36
    •    Fortis液相色谱柱在使用一段时间后,常会出现故障。那么Fortis液相色谱柱堵了应该怎么处理呢?不要慌,下面带您了解一下Fortis液相色谱柱堵了的原因,及其解决方法。
       
        1、Fortis液相色谱柱“堵”的表现:
        “堵”的表现现象就是柱压异常升高,直接原因就是流路不畅。堵塞的主要位置就是在色谱柱的前端,主要原因就是流动相里有杂质,杂质的主要来源就是细菌。
       
        2、Fortis液相色谱柱“堵”的原因分析:
        原因一、配制流动相时细菌污染:
        首先我们要认识到,一般的国产甲醇其实不需要额外过滤处理,直接使用没有问题。即使是有些固态微粒杂质,也能在液相流路系统前端的过滤头上排除,真正容易引起问题的,是水中的细菌。
        新制备的纯水在室内放置几天就会长菌,而这些细菌虽然肉眼不可见,却足以堵塞柱填料颗粒的空隙,造成柱子很快报废。这就是在配制流动相时造成的细菌污染的原因,解决它的方法很简单,就是确保水的可靠性。
        这里有两种方式推荐:
        1、理想的方式当然是购买实验室专用纯水机,既方便又可靠,质量也放心。
        2、成箱购买市售品牌纯净水,这些水的质量足以应付液相色谱的要求。先随机抽取一支做一下细菌平板实验,待菌落数合格方可使用。
       
        原因二:不适当操作:
        常见问题的有以下几种:
        1、在更换零件时选择的型号有误,接口不是很匹配,在拧紧的时候产生变形而使得管路堵塞。
        2、样品处理液净化得不干净,长期会在六通阀和柱之间形成阻塞不畅。
        3、在使用手动六通阀时,有些人可能由于手劲小的原因,转动的不到位,于是造成流路形成了死堵,压力快速升高超过警戒值。
        4、在使用金属管路作出废液管时,应当注意Z好废液瓶中先放一些水,并把废液管的出口端放在液面下。如果位于在液相上且实验使用较高浓度的缓冲盐溶液,在停机时可能在出口端结晶成块并造成堵塞。这种情况不常见,但却的确发生过。
       
        原因三:使用流动相时的细菌污染:
        流动相刚开始没有长菌,在使用时却产生了细菌污染。这主要是在使用多元液相色谱仪时的一种不良使用习惯造成的。举简单的例子:50%的甲醇水流动相,有两种使用方式。一种方式是在上机前就配好混合在一起,另一种方式是在流路A放纯甲醇,流路B放纯水。
        从单纯实验效果来说,后一种有明显的优点:首先是简单,不需要实验者另个计算配比混合,其次就是比例准确,能得到保留时间重复性极好的实验效果。
        但是,它有一个致命的缺陷,就是纯水在流动相瓶中几天时间就会长细菌,一旦有细菌柱子就坏得很快。所以这种方式要求操作人员每次实验都要用新制备的纯水,更要求在每次实验后把水相换掉,换成甲醇冲洗干净,这一点在实际工作中很多人意识不强,就是意识到了但多次使用中总有一两次会遗漏,但是往往这一两次就足以产生致命的影响。因为液相色谱柱的堵塞是不可逆的。
        所以,宁可牺牲小小的保留时间的重复性,也不要用纯水溶液作为流动相的一组。从实际实验效果来说,我建议用10%的甲醇水代替纯水溶液,这样可以有效排除长细菌的隐患,既可作流动相,也可冲柱。就算是在配制流动相时会计算得麻烦一些,但是一次麻烦,终身受益。
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